Alba-STED单分子级细胞定量分析系统Alba v5 STED FFS/FLIM是一款应用于实验室内定量生物学和材料科学研究，具有单分子级检测精度激光扫描显微成像系统。
Alba-STED FFS/FLIM测量:
·1p或者2p共焦成像
·FLIM荧光寿命成像（FastFLIM or TCSPC）
·PLIM磷光寿命成像
·偏振光成像
·荧光光谱波动分析（FCS，FCCS，PCS，FLCS）
·RICS，N&B，Scanning FCS
·BursAnalysis
·FRET高效检测
·3D粒子轨迹跟踪
·20nm分辨率纳米图像重构
Alba-STED for FFS/FLIM主要特点:
·具有独立接口进行单光子和双光子激发
·**4通道检测
·可扩展第五通道检测器或CCD相机
·使用计算机对各检测通道进行单独控制，能够进行高精度FFS成像
·快速扫描成像
·具有偏振模块
·全自动化控制—滤光片切换盘、开关、通光光圈、激光强度和检测通道
·具有友善的软件操作界面，通过VistaVision软件系统可以得到FLIM/ FRET，RICS和FFS（FCS，PCH，scanning FCS，N&B）图像。
激发模式：
·单光子激发模式（激光二极管和超连续激光）
·双光子激发模式（Ti-蓝宝石激光，光纤激光）
显微镜系统：
Alba v5 STED FFS/FLIM系统能够耦合到绝大多数荧光显微镜和正置、倒置显微镜上。
探测器：
·快速GaAs探测器
·混合光电倍增管探测器
·雪崩光电二极管
Alba-STED for FFS/FLIM配置
仪器特点 | 每个通道具有独立接口 电脑选择控制可变光圈孔径大小 电脑选择控制成像平面针孔位置 单光子和双光子激发模式 **4通道数据获取 数码相机辅助接口 |
软件系统 | VistaVision，ISS |
光源 | 单光子激光发射器，电脑控制激光开关，光束大小和激光强度 多光子激光发射器，电脑控制激光开关，光束大小和激光强度 |
激光发射器 | · 3，4，6型激光二极管，通过光纤传到到显微镜中 |
显微镜 | 正置或倒置显微镜 Leica，Olympus和Zeiss多种型号显微镜 |
物镜 | 正常样品—20X，40X，60X放大倍数，1.5-8.1工作距离 油侵样品—1.4 NA 60X（标准），其他放大倍数 水溶液样品—1.2 NA 60X（标准），盖玻片校正（0.15-0.18盖玻片），其他放大倍数 |
双色向滤光镜 | 单光子激发: 1-，2-，3-帯通滤波片 双光子激发 |
偏振 | · 立方分光镜，波长范围：450-1100m，消减比率：10,000：1 +/- 3度 |
载物台 | 大范围移动载物台（10010010 mm） XYZ电动载物台 微距离移动载物台 XYZ压控载物台，100 x100 x50 µm，5m移动分辨率 |
样品夹持器 | 微孔板 培养皿 载玻片 |
光检测器 | APDs GaAs PMT (Model H7422P) Hybrid PMTs (Model R10467U) |
操作系统 | Windows 7, 64-bi |
电源 | 通用电源: 110-240 V, 50/60 Hz, 400 VAC |
尺寸 | 885 mm (L) x 600 mm (W) x 330 mm (H) |
重量 | 40 kg |
Alba-STED for FFS/FLIM
FFS测量 | · 荧光相关光谱（单相关和交叉相关） · 光子计数统计（PCH） · FFS测试（XYZ平台成像） · FLCS，荧光寿命相关光谱 · 扫描FCS · 数值&亮度（N&B） · 光栅成像相关光谱（RICS） |
单点模式测试 | · 强度 · 偏振 · 动力学 · 寿命时间 |
成像模式测试(Single plaand z-stack) | · 强度 · 偏振 · 比率测量 · FLIM |
FLIM成像（数字频域）(single plane and z-stack) | · 获取数字频域（DFD），同时获取FLIM图像和稳态图像 |
FLIM成像（时域）(single plane and z-stack) | · 时间相关单光子计数（TCSPC） |
超高分辨率 | · 粒子追踪 · 纳米成像 |
单分子测试 | BursAnalysis FRET and CoelatioMethods PIE-FRET Methods |
Alba-STED for FFS/FLIM测试举例
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使用FastFLIM技术对60nm荧光颗粒进行成像（共焦（绿色）vs. pSTED（红色））
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使用FastFLIM技术对SiR标记的神经肌动蛋白细胞进行成像（共焦（左边）vs. pSTED（右边））.
增加pSTED分辨能力，使用矢量画图
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60nm荧光颗粒共焦成像（左）；pSTED成像（中间）；基于二进制处理的增强型pSTED图像（右）